IHC študija - pomoč pri dešifriranju biologijo raka na dojki

Kljub temu, da se vedno več klinik, ki se začne uporabljati tehnike genetskega fenotipizacijo tumorjev IHC študija je še danes glavno orodje v dešifriranja biologijo raka na dojki, pri napovedovanju prihodnjega razvoja, "prediktorsko" odziva tumorja na načrtovano zdravljenje.

V tem članku boste izvedeli, kaj imunohistokemični (IHK) študija, pomen IHC ima raka na dojki.

Histokemija (odseki v histologijo obarvanje)

Pred patolog (morfologija) začne pod mikroskopom odsek tkiva dojk, pridobljenega iz biopsije je treba za barvanje njegove posebne barve.

Histokemične uporabljenih barvil na tankem odsek na strani tkiva videti pod mikroskopom, celic, ki so prisotni tam, razporejeni v odnosu drug na drugega (struktura tkiva). Svetlobna mikroskopija je rutinska metoda za preučevanje obarvane dele tkiva, se pogosto uporablja pri diagnozi raka na dojki. Najpogostejši sekcije barvanja tkiva uporabljajo:

• Hematoxylin - to obarva jedra celic v temno modri barvi;
• Eozin - tako rožnato citoplazmo celic. jih delijo z hematoksilin-eozinom imenovano barvanjem.

Kaj je imunohistokemija (IHK)

Patolog - zdravnik, ki je dolgo študiral na Medicinski univerzi, da vedo, kako uporabljati mikroskop razlikovati obarvajo sekcije rakave celice od normalnega tkiva. Običajno diagnozah (benigne ali maligne patologija) zadostuje preučiti pod poglavjih tkivnega mikroskopske obarvali s hematoksilinom in eozinom. Ampak včasih to ni dovolj. V tem primeru, pomoč prihaja imunohistokemično, ki je morfološko identifikacijo celic in tkiv dodaja imunološki komponento.

Postopek imunohistokemija (IHK) odkrivanje morfoloških dopolnjuje celic in tkiv, ki uporabljajo protitelesa z znanimi antigeni, ki so specifični za določene vrste celic ali celičnih komponent. Lokacija teh protiteles je mogoče videti s pomočjo svetlobnega mikroskopa, saj protitelesa obsega vizualno-prepozna oznako.

Prva tehnika imunohistokemični analizi raka dojke uporabo protiteles z dodanim fluorescentne oznake, ki zahteva uporabo posebne fluorescenčni mikroskop, ki omogoča lokalizacijo teh protiteles videti rez v tkivu dojke.

V zadnjih 30 letih se je bistveno poenostavi tehniko, ki se uporablja za raziskave IHK raka dojke z uporabo specifičnih protiteles (monoklonsko protitelo), z oznako encimsko. To pa, dovoljeno uporabo svetlobnim mikroskopom z raziskavami Imunohistološka raka na dojki, ki je veliko cenejši in zato bolj dostopna. Vendar, radioaktivni elementi (peroksidazni, alkalne fosfataze in fluorescein), brez katerih včasih ne zahtevajo posebne tehnike in se še vedno pogosto uporablja.

Potrebo po uporabi imunohistokemično pri raku dojke, kontrolo kakovosti in interpretacija rezultatov je treba spremljati patologijo oddelek. Pomembno je, da se podatki, dobljeni dekodirne IHC študije uporabljajo le v povezavi s morfološko analizo tkivu dojke, pridobljen z barvanjem s hematoksilinom in eozinom.

Danes imunohistokemija pri raku dojke je najbolj rutinska metoda morfoloških (histopatoloških) laboratoriji in se uporablja za diagnozo in prognostičnega namen, kot napovedni (napovedni) kazalec obnašajo kot rak dojk v prihodnosti.

Rak na dojki in IHC

Ko se patolog vidi pod mikroskopom biopsijo materiala, se je soočila z dvema osnovnima diagnostičnih naloge: ugotoviti izvor tumorskih celic, kjer so bili (v vodi, v lobules, ali v drugih delih prsi) in se potrdi ali ovrže svojo invazijo najbližji tkiva.

Diagnostični IHC označevalci se uporabljajo za raka dojke

Od prvih dni uporabe v onkologiji IHC je bila izvedena v iskanje novih in izboljšanih tehnik uporabo obstoječe protitelesa, ki lahko identificirajo celice antigene z visoko specifičnostjo in občutljivostjo. Naslednji IHC označevalci so zdaj široko uporabljajo za razjasnitev histopatološko diagnozo raka na prsih:

citokeratinov

• CK5, CK10, CK14 in CK17 so citokeratin bazalni plasti epitelija, myoepithelial celice izražena.
• CK5 / 6 ali "bazalnih citokeratinov" pomagala opredeliti normalno dojki myoepithelial celice, kot tudi laminaren (izločajo).
• 34 12: protitelo pomaga prepoznati citokeratine 1, 5, 10 in 14.

Označevalci gladkih mišic

• H-caldesmon. To je mogoče najti le v prsi duktusu myoepithelial celic, tako da ima visoko specifičnost.
• Gladkem mišičju aktina (SMA). Ta protitelesa pomaga odkriti aktina v mikrofilamentah- nizki specifičnosti, saj je ATVP odkriti v fibroblaste (v tkivih, ki so se regenerirajo).
• Miozin težke verige gladkih mišic (SMMHC) - strukturni elementi v gladkih mišičnih miozin izoobliko SM2. Izraženo myoepithelial dojke, ima visoko občutljivost in specifičnost, kot SMMHC prisotna samo v myoepithelial celic urejenih v kanalih in lobules v mlečnih žlezah, vendar ne v fibroblastih veznega tkiva žleze.
• Calponin - polipeptid od 34 kDa, modulira aktivnost actomyosin. Dobra občutljivost, vendar je prisotna v mlečnih fibroblastov vezivnega tkiva.
• P63-p53 homolog - jedrska dvojno podajo je zelo občutljiva myoepithelial celice.
• Calla: Endopeptid, ki je izražena v myoepithelial celicah.
• P-cadheriadhezijske molekule celice z visoko občutljivostjo za myoepithelial celicah normalno tkivo dojke - n. To ne reagira z fibroblastov.

drugi označevalci

• E-cadherin - celične adhezijske molekule. To se uporablja za razlikovanje duktalni karcinom "v suti" (DCIS) v lobularni. Karcinom "v suti" (LCIS) - DCIS, običajno označene z barvanjem membrane, v nasprotju z LCIS, v katerem je ni.
• označevalci melanoma: S100, Melan-A HMB45.
• limfocitov označevalci: CD20, LCA, CD15, CD30.
• vaskularni endotelni označevalci: CD31, CD34, faktor VIII, d2-40 (podoplanin).
• označevalci proliferacije celic: Ki67, MIB-1, PPh3.
• apoptosis označevalci: Bcl-2 in Bax, Bcl-X.

Primeri uporabe IHC rešitev težav, s katerimi se srečujejo pri določanju patologije dojke

Obstaja veliko situacij, v katerih imunohistokemija prispeva k oblikovanju končnega histopatološko diagnozo v patologiji dojke:

• Obarvanje E-kadherina celične membrane odpravlja lobularni neoplazije (ALH) in LCIS. Pomanjkanje barvanja celične membrane podpira lobularni tumorjev.
• Normalno epitelijska hiperplazija, epitelijskih atipičnosti ali to ali ono DCIS. V benigna hiperplazija zazna odzivu na CK5 / 6 in CK14, medtem ko z netipičnim hiperplazijo in DCIS ne.

Ta mikro-invazivni karcinom ali kaj drugega? Uporaba myoepithelial označevalcev celične je ključnega pomena za določanje, ali mikro karcinom invazijo a (vdor laminarni sloj v myoepithelial celic). Reaktivnost fibroblastov, vrzel v obarvanjem celic, myoepithelial obarvanje celic vaskularnega gladkega mišičja lahko povzroči težave pri razlagi raziskani vzorec pod mikroskopom. Dve markerji myoepithelial celice, ki se uporabljajo v tem primeru, na primer, P63 in SMMHC ali Asma, ali calponin.

Kaj IHC označevalci se uporabljajo v diagnostičnih panelov patologije dojke

Niz označevalcev (diagnostični plošča), ki se uporablja v študijah IHC pri raku dojke, v veliki meri odvisna od opreme laboratorija, v katerem za izvedbo imunohistokemično, in izkušnje zdravnika jo opravlja. Spodaj so priporočila, ki jih je treba IHC plošče, ki se uporabljajo pri dojke patologija, če ena od klinik:

• Miozin težke verige gladkih mišic (SMMHC) ali calponin - občutljive in specifične markerje do myoepithelial celic citoplazmo;
• Gladke mišice aktina se lahko uporablja, vendar še vedno v razlagi je treba opozoriti, da je prisotna v fibroblaste (vnetje in brazgotina);
• P63 je občutljiv in specifičen dvojno podajo z jeder myoepithelial celic obarvanje lahko pa nezvezno. Uporaba označevalca v citoplazmo myoepithelial celic kot SMMHC ali calponin, je treba uporabiti, da se izognemo morebitnim težavam pri razlagi slike pridobljene.

Pri poskusu za ugotavljanje prisotnosti ali odsotnosti myoepithelial celic in P63 je treba uporabiti SMMHC ali calponin.

Vloga imunohistokemijo v opredelitvi "perspektivne" in "predvidevanjem" dejavnikov pri raku dojk

Napovedni dejavniki zagotovijo informacije o možni obnašanja raka dojke v času diagnoze in so neodvisni od zdravljenja. To pomeni, da s pomočjo njih lahko presodijo, kako bo hitro napredovala in raka, in sicer glede na to, da se odločite, koliko in zdravljenja prednost v vsaki situaciji.

V zameno, "predvidevanjem" (napovedati) dejavniki so informacije, ki daje podatek o verjetnosti odziva tumorja na določeno terapijo. Kljub temu, da lahko napovedni in napovedni dejavniki organizirajo ločeno v diagnostiki in klasifikacijo raka dojk pogosteje sta oba prognostično in predvidevanjem.

Na primer, prisotnost visoko ekspresijo HER2. Če je rak dojk HER2 pozitivno (veliko število HER2 proteina v tumor), ki je potreben agresivna, z zgodnjim metastaz v oddaljene organe. Ampak, če je tumor vsebuje majhno količino tega proteina (rak dojk HER2 negativen), da ne bo odzval na uporabo ciljno zdravila Herceptin.

"Bazalnocelični" IHC označevalci

Obstaja delitev Rak na dojki odvisno mimo katerega geni izrazijo svoje celice (izražanje genov profilu). Tumorji s profilom, ki je značilen za bazalni ali myoepithelial celicah normalne dojke, bo pokazal prisotnost "bazalnih" markerje. Takšni tumorji imajo slabo prognozo. Pri večini teh "bazalnih" tumorjev popolnoma odsotna ER, PR (receptorji za estrogena in progesterona) in HER2 proteina. Pogosto metastaze na možganih, pljuča.

Danes ni soglasja o imunohistokemičnim profilu (IHC označevalcev, ki jih je treba uporabiti), ki bi jasno opredelila "bazalnih" rakovice. Ti tumorji s slabo prognozo vključuje tako imenovani "trojno negativen rak dojke", v katerem ni ER, PR in HER2, vendar izraženo bazalnih citokeratine 5/6 in 14 je epidermalni rastni dejavnik (EGFR) in c-kit. Prav tako lahko izrazijo P-cadherin in pogosto P63.

Obstaja podobnost med "basal", raka dojke in raka, ki jih odkrije pri ženskah z BRCA1 mutacijo.

EGFR se izraža pogosto v "bazalnih" raka, zato lahko bolniki s takšnimi tumorji koristi pri zdravljenju zaviralcev EGFR.

IHC označevalci proliferacijo (stopnja rasti tumorja)

Število in delež mitotićnih celic v mitozo, že dolgo velja za morfološko "biomarkerjev" rak prognozo. Obstajajo številni IHC markerjev, ki kažejo proliferativno aktivnost celic (število mitozah):

• Ki67 - antigen, ki je izražen v jedrih celic v vseh fazah celičnega cikla in je uporaben označevalec celične proliferacije;
• MIB1 - protitelo, ki reagira s Ki-67 v tkivu ali formalinom fiksno parafin;
• PPh3.

IHC označevalci apoptoze

Apoptoza, ali "programirana celična samomor" je biomarkerjev agresivnih tumorjev. apoptotičnimi proteini lahko identificiramo z imunohistokemijo:

• Bcl-2;
• Bax;
• Bcl-X.

Drugi "perspektivne" označevalci

• p53. Mutacije v zaviralnih genov p53 (TP53) odkrit v 20-30% primerov raka na prsih. Te genske mutacije so pogostejše pri ženskah z dednih sindromov raka dojk kot ženske z rakom sporadično. Pri bolnikih z genetsko predispozicijo za raka na dojki, se lahko priporoča testiranje p53. Odkrivanje mutacij v p53 se šteje tudi kot možni napovedovalec odgovor raka dojke s kemoterapijo, ampak odkrivanje proteina p53 z imunohistokemijo v tumor ne odraža stanje p53 mutacije.
• Topoizomeraze II-alfa. To je cilj, na katerega se tožba antraciklin - kemoterapevtsko zdravilo, ki se pogosto uporablja pri zdravljenju raka na dojki.